Quels sont les besoins nutritifs des cellules non chlorophylliennes ?

Culture de Levures (Champignons unicellulaires)

La culture utilisée ici a été ensemencée avec de la Levure de boulanger (levure fraîche).

- On a préparé, dans des conditions stériles, 2 petits tubes : un avec 5 mL de milieu YPG complet, l'autre avec 5 mL de milieu YP sans glucose.
- On a ensemencé, dans des conditions stériles, avec une goutte de suspension de Levures. Tous les jours, une série de 2 tubes sont mis au réfrigérateur pour bloquer la multiplication des Levures.

Milieux de culture utilisés (composition pour 1 L de milieu)
| Quantité
Composé | Milieu YPG (complet) | Milieu YP (sans glucose)
glucose | 20 g | 0 g
Peptone (protéines) | 10 g | 10 g
Extrait de Levures | 10 g | 10 g

Travail à réaliser :

- Faire deux comptages de levures (un pour chaque milieu de culture) pour un temps donné (les tubes seront répartis entre les groupes). (voir la méthode de comptage ci-dessous).
- Vous utiliserez une nouvelle case pour chaque milieu. Vous n'oublierez pas d'identifier avec une marque verte (milieu YPG) ou rouge (milieu YP) les cases de la lame Kova que vous utilisez.
- Noter vos résultats sur votre compte-rendu et sur le tableau récapitulatif. Noter aussi les résultats des autres groupes.
- Tracer un graphique récapitulant les résultats observés. (Variation du nombre de cellules en fonction du temps, une courbe pour chaque milieu de culture).
- Commenter les résultats obtenus.

Méthode de comptage de la densité de cellules d'une suspension de Levures avec une lame Kova. Bien agiter la suspension pour l'homogénéiser. Faire pénétrer, par capillarité, une goutte de suspension dans une case de la lame Kova. Observer au microscope au grossissement x 40 ou x 100. Repérer la série de carrés. Passer à un plus fort grossissement si nécessaire pour compter le nombre de cellules de Levures dans une série de carrés pris au hasard (1 dans chaque grand carré de 9 cases). Les cellules chevauchant une limite ne sont pas comptées. Faire la moyenne (m) des résultats. Le nombre moyen de cellules par mm3 est donné par la formule : n = 100 x m. Pour gagner du temps : Prendre une photo, à l'aide d'une caméra placée sur le microscope, de 2 petits carrés de comptage. Choisir pour cela une zone représentative (ou la densité des cellules a une valeur moyenne). Tirer la photo sur imprimante (1 exemplaire par élève et un exemplaire pour ceux qui travaillent sur les algues). Compter le nombre de cellules par carré en cochant les cellules comptées. Noter les résultats.